SMIP-016, a new anti-tumour agent, is a mouse/human chimeric fusion protein built on the ADAPTIR™ (modular protein therapeutic) platform targeting human CD37. In this study, for the first time, we examined pro-apoptotic activity of SMIP-016 in combination with monoclonal anti-CD20 antibody, ofatumumab (HuMax-CD20) in de novo chronic lymphocytic leukaemia (CLL) cells and in different B-cell neoplasm-derived lines. In CLL cells SMIP-016 exerted significant cytotoxicity (versus control – p = 0.01). In the in vitro models, SMIP-016 was also distinctly active against Raji line (Burkitt lymphoma; BL) (versus control – p = 0.007), Riva-1 line (diffuse large B-cell lymphoma; DLBCL) (versus control – p = 0.002) and RPMI 8226 line (multiple myeloma cells; MM) (versus control – p = 0.03). In studies combining SMIP-016 and ofatumumab, the cytotoxicity against CLL cells was significantly higher than the agents used alone (p < 0.03). Remarkably enhanced cytotoxic activity of SMIP-016 and ofatumumab in combination was also observed in Raji and Riva-1 cell lines (p < 0.01 and p < 0.003, respectively). Importantly, both agents induced cytotoxicity at very low concentrations which suggests that potential side-effects may be decreased in clinical practice. The mechanism responsible for cytotoxicity of SMIP-016 in all the examined models was connected with caspase-dependent apoptosis. In majority of cell types SMIP-016 induced overexpression of Bax protein, as well as downregulation of Bcl-2, cIAP1 (p < 0.03) and Smac/DIABLO (p < 0.003) apoptosis-regulating proteins.
In conclusion, our study demonstrated high pro-apoptotic activity of SMIP-016, especially in combination with ofatumumab, against ex vivo CLL cells, and BL or DLBCL in vitro cell lines. Thus, further preclinical studies in in vivo models are warranted, as this combination may be a promising therapeutic concept for treatment of those malignancies.
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SMIP-016, un nouvel agent anti-tumeur, est une protéine de fusion chimérique souris/humain construite sur la paalteforme ADAPTIR ™ (protéine thérapeutique modulaire) ciblant CD37 humain. Dans cette étude, pour la première fois, nous avons examiné l'activité pro-apoptotique de SMIP-016 en combinaison avec l'anticorps monoclonal anti-CD20, l'ofatumumab (HuMax-CD20) dans la leucémie lymphocytaire chronique (CLL)et différentes lignées de cellules B dérivées de néoplasme. Dans les cellules de LLC, SMIP-016 a exercé une cytotoxicité significative (par rapport au contrôle - p = 0,01). Dans les modèles in vitro, SMIP-016 a également été nettement active contre la ligne Raji (lymphome de Burkitt; BL) (par rapport au contrôle - p = 0,007), dans la ligne Riva-1 (lymphome diffus à grandes cellules B; LMNH-B) (par rapport au contrôle - p = 0,002) et RPMI 8226 (des cellules du myélome multiple; MM) (par rapport au contrôle - p = 0,03). Dans les études combinant SMIP-016 et l'ofatumumab, la cytotoxicité contre les cellules CLL était significativement plus élevé que les agents utilisés seuls (p <0,03). Fait remarquable, l'activité cytotoxique accrue de SMIP-016 et en combinaison ofatumumab a également été observée dans Raji et Riva-1 lignées cellulaires (p <0,01 et p <0,003, respectivement). Fait important, les agents induit une cytotoxicité à des concentrations très faibles ce qui suggère que les effets secondaires potentiels peuvent être diminuées en pratique clinique. Le mécanisme responsable de la cytotoxicité de SMIP-016 dans tous les modèles examinés a été relié à la apoptose dépendante de la caspase. Dans la majorité des types de cellules SMIP-016 a induit une surexpression de la protéine Bax, ainsi que la régulation négative de la protéine Bcl-2, cIAP1 (p <0,03) et Smac / DIABLO (p <0,003) des protéines régulant l'apoptose.
En conclusion, notre étude a démontré une forte activité pro-apoptotique de SMIP-016, surtout en combinaison avec l'ofatumumab, contre des cellules CLL ex vivo, et in vitro de lignées cellulaires BL ou dans DLBCL. Ainsi, d'autres études précliniques dans des modèles in vivo sont justifiées, car cette combinaison peut être un concept thérapeutique prometteur pour le traitement de ces tumeurs malignes.